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01 . 大鯢糖肽組分的高效液相色譜分析及其抗氧化活性研究摘 要 :利用高效液相色譜 方法對大鯢糖肽進行 分析 ,使 用 SinoChrom Cs反相柱 和紫外 可變 波長檢 測器 ,并測 定 大 鯢 糖 肽 的羥 基 自由基 清 除 能 力 。結 果 表 明 :大 鯢 糖 肽 組 分 的最 佳 液 相 色 譜 檢 測 條 件 為 :檢 測 波 長 280nm; 流 動 相 為 V(乙 腈 ):V (甲醇 ) :V(0.1 三 氟 乙 酸 ) 一5:5:90; 流 速 1_0mL/min;進 樣 量 20μL。大 鯢 糖 肽 在 5.78 μg/mL濃度 時 ,羥 基 自由基 的 清 除 率 達 60.19 ,具 有 較 好 的 抗 氧 化 活 性 。 關 鍵 詞 :大 鯢 ;糖 肽 ;高 效 液 相 色 譜 ;抗 氧 化 活 性
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02 . 大鯢低聚糖肽安全性的毒理學初步研究摘 要: 目的 研究大鯢低聚糖肽的安全性。方法 采用小鼠急性經口毒性實驗、小鼠骨髓細胞微核實驗和大鼠 30 d 喂養實驗, 評價大鯢低聚糖肽的安全性。結果 雌、雄性小鼠急性經口在 11764.7 mg/kg·BW劑量時, 未見毒性不良反應, 根據急性毒性劑量分級標準, 大鯢低聚糖肽屬于無毒級; 大鯢低聚糖肽無致小鼠骨髓細胞微核效應, 30 d 喂養實驗未見大鼠的生長發育、生物化學指標、臟器/體質量比值比及病理學變化。結論 毒性實驗未見大鯢低聚糖肽產生明顯毒副作用。 關鍵詞: 大鯢; 低聚糖肽; 毒性; 小鼠; 大鼠
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03 . 間接酶聯免疫吸附法則測定大鯢凝集素摘要:[目的]建立基于大鯢凝集素多克隆抗體酶聯免疫定量分析的方法。[方法]以大鯢凝集素為抗原,免疫新西蘭白兔獲得多克隆抗體,建立間接非競爭酶聯免疫檢測方法,并對該方法的精密度及準確度進行了測試。[結果]獲得的抗血清效價為1:16000,多克隆抗體血清的最佳稀釋度為1:3000,辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗兔二抗最佳稀釋度為1:30000,抗原濃度在31.25~1000.00ng/mL范圍內呈良好的線性關系,相關系數R2>0.99,板內及板間變異系數范圍分別為2.50%~9.88%和2.69%~11.59%,回收率為91.5%~109.5%。分布結果顯示,大鯢凝集素在軀干部肌肉組織中的含量較高。[結論]成功建立了大鯢凝集素間接非競爭酶聯免疫檢測方法,該方法靈敏度高,重復性好,可用于實際檢測大鯢肌肉組織中的凝集素含量。 關鍵詞:大鯢;凝集素;酶聯免疫;多克隆抗體
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04 . 大鯢皮膠原蛋白肽的結構特性及其對乙醇誘導肝損傷小鼠的保護作用摘要:研究了大鯢皮膠原蛋白肽結構特性及其對乙醇誘導肝損傷小鼠的保護作用。大鯢皮經胃蛋白酶水解制備膠原蛋白,經木瓜蛋白酶水解制備大鯢皮膠原蛋白肽。紫外光譜及紅外光譜結果表明,大鯢皮膠原蛋白肽具有膠原蛋白的三股螺旋結構。SDS-PAGE結果表明大鯢皮股原蛋白肽分子量低于55ku。大鯢皮膠原蛋白肽低(50mg/(kg?d)、高(150mg/(kg.d))劑量組可顯著抑制小鼠乙醇誘導產生的血清中AST、AI,T活性的升高,顯著抑制肝組織MI)A含量升高,并且抑制肝組織中SOD活性的下降。組織病理表明,乙醇誘導肝損傷模型組小鼠肝細胞明顯腫脹變形,肝細胞索紊亂,伴有炎癥細胞侵潤,大鯢皮膠原蛋白肽各劑量組的肝細胞排列規則、肝細胞索清晰。結果表明,大鯢皮股原蛋白肽具有保護乙醇誘導小鼠肝損傷的作用。 關鍵詞:大鯢,皮膚,膠原蛋白肽,乙醇,肝損傷
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05 . 大鯢胃蛋白酶分離純化及其性質的研究摘要:通過研究大鯢胃蛋白酶,可以了解大鯢消化機能,同時為食品加工提供新的材料。經80%硫酸銨沉淀、DEAE52離子交換層析、SephadexG-100凝膠過濾層析以及HPLC,得到大鯢胃蛋白酶電泳純制品。純化倍數為239.87,回收率為4.4%,經SDS-PAGE測得該胃蛋白酶分子量為31ku,大鯢胃蛋白酶的最適溫度是40℃,低于40℃穩定,當溫度上升,活性迅速下降;最適pH為2,在pH2~6有很好的穩定性。EDTA、BrAc、NBS使該酶活性下降。以酪蛋白為底物,在pH2.0、40℃時測得米氏常數Km值為7.3×103mg/L,Vmax是2.674μg/min。 關鍵詞:大鯢,胃蛋白酶,純化,性質
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06 . 大鯢肉酶解產物的制備及其抗氧化性的研究摘要:以大鯢肉為原料,利用Aspergillus sp.酸性蛋白酶進行酶解,研究其最佳的酶解條件以及酶解產物的抗氧化怍用。結果表明,大鯢肉酶解的最佳工藝條件為Aspergillussp.酸性蛋白酶加酶量為0.4(質量比)及底物濃度為0.1g/mL時,酶解時聞5.5h,pH2.0,溫度45℃。時間飛行質譜表明酶解產物的分子量小于2000,苯酚硫酸法測定糖含量為2,Fo1in一酚試劑法測蛋白含量為93。大鯢酶解產物清除羥基自由基(·OH)和DPPH自由基的能力隨濃度升高而增強。 關鍵詞:大鯢肉;酸性蛋白酶;抗氧化活性
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07 . 大鯢肽在牙膏中的應用研究摘要:采用酶法從人工飼養大鯢肉中提取得到大鯢肽,利用串聯飛行時間質譜儀(MALDI-TOF/TOF)測定其分子量主要為1422,1521,1746,1828和1879,均小于2000,酶解產物大鯢肽為低聚肽。將提取到的大鯢肽應用到牙膏中,應用自由基清除活性評價方法研究了大鯢肽牙膏的抗氧化活性。結果表明,牙膏中添加質量分數為0.1%的大鯢肽可達到較好的抗氧化效果,其牙膏水溶液具有清除DPPH自由基、羥基自由基(·OH)、超氧陰離子自由基以及ABTS自由基的能力。 關鍵詞:牙膏;大鯢肽;抗氧化
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08 . 沸水浴時間對大鯢肽抗氧化活性影響的研究摘要:對大鯢肽溶液分別進行時長0,3,5,10min的沸水浴,測定其抗氧化活性能力的變化情況。結果表明,不同時間沸水浴處理的大鯢肽水溶液對DPPH·,ABTS+·,·OH3種自由基的清除能力無顯著性差異。因此,沸水浴時間對大鯢肽的抗氧化活性并沒有顯著影響。 關鍵詞:大鯢;肽;抗氧化;沸水浴
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09 . 大鯢體表黏液透明質酸提取及其抗氧化活性的研究摘要:為了開發利用子二代大鯢黏液,研究了酶解大鯢黏液提取透明質酸(HA)的工藝。通過高效液相色譜法、傅立葉變換紅外光譜法、核磁碳譜分析了HA的分子量、所含基團,以及體外清除自由基和還原Fe3+檢測了其抗氧化能力。結果表明,影響胰蛋白酶提取大鯢HA的主要因素為酶解溫度和酶解時間,大鯢HA分子量為4.85×10^6Da,具有體外清除DPPH·,·OH,ABTS+·和還原Fe3+能力。因此,大鯢黏液可作為透明質酸潛在的來源。 關鍵詞:大鯢黏液;透明質酸;純化;抗氧化